我们将在下面为你带来的内容是关于荧光光谱分析的基本原理。

稳态荧光光谱分析的两种基本图谱是激发光谱和发射光谱。激发光谱(Ex)是记录固定的荧光发射波长下，不断变化的激发光波长与测得的荧光强度的关系图谱；而记录在固定的激发波长下不断变化的发射波长与荧光强度的关系图谱，即是发射光谱(Em)。这两种光谱均可用来鉴别荧光化合物，还可作为进行荧光测定时选择合适的激发波长和发射波长的直接依据。根据发射光波所处的波段范围，可将荧光分成X射线荧光、紫外荧光、可见荧光和红外荧光等。

因为荧光仪器个体差异和各自的特性(如光源的能量分布、检测器的敏感度和单色器的透射率都会随波长而改变)不同，一般情况下测得的激发光谱和发射光谱都是表观光谱。也就是说，同一荧光物质的溶液在不同荧光仪器上所测得的两个表观光谱往往会有一定程度的差异。但是对所用仪器特性波长因素加以适当校正后，可以获得彼此一致的校正光谱(又称真实光谱)。对于同一种荧光化合物，其激发光谱的形状在理论上应与吸收光谱的相同，但是由于上述测试仪器的特性波长因素存在，其表观激发光谱与吸收光谱的形状大多有所差异，只有校正激发光谱才与吸收光谱接近。另外，只有当化合物的浓度足够小，其对不同波长的入射光的吸收正比于其吸光系数，而且其荧光量子产率与激发波长无关的条件下，所得的校正激发光谱与吸收光谱的形状才相同。

X射线荧光的原理图

通常物质吸收光谱会因为复杂的分子结构含有多个不同的吸收谱带，但是其荧光的发射光谱一般只含一个发射谱带。从能量和能级结构关系图上看，物质分子受到电磁辐射后，其电子会从基态跳跃(激发)到多个电子单重态的不同振动能级，进而产生多个吸收谱带，该跃迁过程的经历时间大约是10-15s；处于激发单重态的电子不稳定，寿命很短。在回跳到基态的过程中，因为存在变化速率极快的内转化和振动松弛等现象，处于S2单重态以上各振动能级的电子会很快损失多余的能量，衰变到S1态的最低激发振动能级，最后回跳到基态的各个振动能层，发射出荧光。因此，只要激发光没有导致化合物光解，无论激发波长是多少，多数情况下同一物质的分子发射光谱只含一个发射带，并且荧光发射光谱的形状通常是一致的。发射光谱的形状只与分子基态中振动能级的分布情况以及各振动能级的跃迁概率有关。当然也有例外，例如有些荧光化合物有两个电离态，而每个电离态就会显示出不同的吸收和发射光谱。

以上就是这次为您带来的关于荧光光谱分析的相关问题，原理。